研究遺傳學的意義范文

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關鍵詞：細胞生物學;醫學遺傳學;實驗教學;教學質量

中圖分類號：G40-034 文獻標志碼：A 文章編號：1008-3561（2015）03-0085-01

細胞生物學和醫學遺傳學是醫學院校的基礎課程，也是一門實驗性很強的學科。細胞生物學和醫學遺傳學的教學分為理論教學和實驗教學兩部分。實驗教學與理論教學聯系密切，相輔相成，不可或缺。細胞生物學和醫學遺傳學實驗教學要重視對學生獨立觀察、思考和操作能力的培養，學習能力和創新能力的培養，以及分析問題、總結問題能力的培養。綜合多年來對臨床醫學、口腔醫學等專業學生的實驗教學實踐和探索，筆者就實驗教學提出幾點體會，以期培養出高素質專業型醫學人才。

一、提高教師自身素質

首先，教師應通過網絡高校教師在線培訓和查閱最新文獻，不斷學習新的理論和技術，應用到日常實驗教學中，讓學生了解一些科學前沿的知識，充實教學內容。其次，基礎學科教師還要兼具臨床醫學方面的知識，為學生日后走向臨床打下堅實的基礎。另外，高素質的師資隊伍是保證實驗教學水平不斷提高的關鍵。近年來，我科室教師不斷提升自己的學歷，通過在職進修、脫產學習等方式提升師資隊伍的學歷水平。

二、改變教學模式，提高學習興趣

在以往的教學中，學生的一切實驗行為都由教師安排，教師是主體，學生只是被動地接受，忽視了學生的自主意識。標本片都是教師給準備好的，直接在顯微鏡觀察即可。整個教學過程學生缺乏主動性，教學效果欠佳。如學生進入教室，首先就把教師提前在黑板上寫好的目的、原理和實驗步驟抄寫下來，顯微鏡下觀察標本片也是敷衍看看，結果有的就按照書上畫，或者互相抄襲，如同完成任務一樣完成實驗報告。事實上，在細胞生物學和醫學遺傳學實驗課中，學生也應該是實驗的參與者，而不是任務的執行者。因此，適當地安排一些由學生自己動手制作完成的實驗用品對于提高學生的學習興趣能起到很好的作用。如以前我們實驗課學習顯微鏡的使用，我們讓學生學會顯微鏡如何操作后，給學生一些已經制作好的各種組織的標本片進行觀察。而現在，我們讓學生自己動手制作標本片，取材更是取自學生自己的口腔上皮細胞，這樣，學生的制作熱情和觀察熱情就被激發了出來。每個學生都積極地制作一張自己的口腔上皮細胞標本片，放在顯微鏡下仔細觀察，認真繪圖。有的學生還用手機拍下來，看著自己親手制作的標本片，很有成就感和參與感，教學效果顯著提高。

三、采用多種教學手段輔助教學

有些實驗理論較為抽象，學生理解起來有一定的難度。尤其是對于文科學生，細胞生物學和醫學遺傳學的知識以前幾乎沒有學習過，基礎薄弱。怎么能讓這些學生快速入門呢？我們除了常規的板書以外，應利用現代科技手段、多媒體動畫輔助教學，真正做到抽象的理論直觀化，讓學生對于整個實驗原理是如何發生發展的一目了然。舉例來說，在細胞有絲分裂觀察實驗中，細胞有絲分裂的過程既是重點又是難點，復雜且抽象。但是借助于三維立體動畫展示，可把整個有絲分裂過程，即兩組完全一樣的染色體如何精確分離的過程清晰明了的呈現在學生眼前。通過這樣的展示，學生輕松地掌握了實驗理論，為接下來的細胞形態觀察和畫圖打下了良好的理論基礎。

四、改進教學方法，理論與實際相結合

教師在教學過程中常規使用的教學方法是講授法，這樣學生理解起來比較被動，只能跟著教師的思路走，忽視了學生對知識獲得的自主性和能動性。現在，我們除了講授法外還加入啟發式教學，并注重理論與實際結合起來，調動了學生思維的主動性，為學生的持續發展創造了更廣闊的空間。例如人類染色體觀察與核型分析實驗中，在講授正常染色體形態、數目前，先提問學生是否見過先天愚型的人。學生在教師的啟發下開始積極思考，回答出自己見過哪些人，有什么樣的特征，如表情呆滯、發育遲緩、身材矮小等。教師接著提問這些人為什么有這樣的缺陷，學生一般答不上來。教師就可以解釋因為他們多了一條23號染色體，就造成了人生這么大的缺憾，所以今天我們要先把正常染色體的形態數目了解清楚，才能對一些遺傳學疾病采取積極地預防措施。通過這樣的講解，學生明白了學習和研究染色體的重大意義，學習態度也認真了許多。同時，還激發了學生投身科研、造福人類的熱情。

五、教學相長，亦師亦友

傳統教學中，學生對老師是比較敬畏的，課堂氣氛也比較嚴肅，教師在前面講，學生在下面做筆記。實際上，我們應該改變這種刻板的場景，與學生多一些交流與溝通。如可讓學生暢談自己對于某些理論、某些現象的看法，教師給予糾正和補充，從而加深學生對知識的理解與記憶。尤其是實驗課，學生有任何問題隨時都可以提出來讓老師幫助解決，或者學生有更好的建議可以應用于實驗教學，這樣才能做到教學相長。

通過以上幾點，充分調動了學生的學習積極性，活躍了課堂氣氛，豐富了教學內容，培養了學生嚴謹的實驗態度和科研意識，細胞生物學和醫學遺傳學實驗教學取得了較好的教學效果。

參考文獻：

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關鍵詞：表觀遺傳學 教學 研究生

中圖分類號研究生教育是高等教育的重要組成部分，是培養高素質、高層次人才的重要手段。今天的社會對研究生的全面素質和創新能力提出更高的要求，而專業課教學是研究生教育的最基本部分，是提高研究生專業素質和創新能力的直接途徑，因此，提高專業課教學水平對研究生的培養具有十分重要的意義[1]。隨著生物技術和醫學科學技術的迅速發展，知識更新速度加快，學科之間相互交叉、相互滲透，邊緣學科和新興學科不斷涌現。表觀遺傳學是近幾年來生命科學迅速發展的前沿學科之一，其理論與技術已經廣泛滲透至生物學、基礎醫學、臨床醫學及預防醫學的各個學科。表觀遺傳學是我們學院學術型碩士研究生專業課程和專業學位碩士研究生專業知識模塊的主干課程。如何適應新形勢下研究生培養的需要，筆者主要針對研究生表觀遺傳學教學談一些自己的看法及建議。

1 教師業務素質的提高

生物醫學模式的轉變對教師的業務素質和能力提出了相應的更高要求。不僅要求教師有生命科學、基礎醫學和臨床醫學的專業知識，而且還要有生物醫學理論方面的知識，同時要求教師的技術知識層次能跟上生物醫學實驗技術推廣周期不斷縮短的趨勢。我們在研究生的表觀遺傳學教學中，隨時進行文獻調研，密切關注最新高水平期刊和學術會議的相關信息，不斷補充傳達的最新知識。引導學生關注當前研究活躍的腫瘤、衰老、心血管疾病、感染性疾病與表觀遺傳學的最新研究進展情況，著重介紹營養、環境、應激、細胞代謝在表觀遺傳變化中的重要作用機制。這些新知識非常受研究生的歡迎，引起他們濃厚的興趣。通過這些新知識的學習，不僅開闊了研究生的學習視野，啟發了他們的創新思維，同時使他們形成良好的文獻調研和學術研討的習慣，逐步形成和掌握正確的科研方法，為即將開展的課題研究工作奠定了堅實的基礎。在教學過程中反過來能進一步促進教師知識結構的不斷更新，達到教學相長的目的。

2 改革教學內容，形成完整的表觀遺傳學知識結構體系

與經典遺傳學以研究基因序列決定生物學功能為核心相比，表觀遺傳學主要研究基于染色質事件對于這些“表觀遺傳密碼”的建立和維持的機制，及其如何決定細胞的表型和個體的發育。在表觀遺傳學研究生課堂教學過程中必須具有一定的前瞻性，引導研究生關注表觀遺傳學學科的發展動態，密切注意學科的交叉和延伸，緊跟表觀遺傳學的發展方向和學科發展的突破點。課堂教學過程中把最主要的精力放在表觀遺傳學學科領域發展最活躍最富潛力的研究方向上，例如表觀遺傳機制在癌癥等疾病中的作用機制，細胞代謝與表觀遺傳變化的關系等。表觀遺傳學是生命科學中一個普遍而又十分重要的新研究領域。它不僅對基因表達、調控、遺傳有重要作用，而且在腫瘤、免疫、病毒感染復制等許多疾病的發生和防治中亦具有十分重要的意義。在教學過程中主要內容包括：表觀遺傳學概論，DNA甲基化，組蛋白修飾，染色質重塑，基因組印記，X染色體失活，siRNA與miRNA介導的調控，表觀遺傳學與疾病，表觀遺傳學與癌癥，天然產物及中草藥的發展對表觀遺傳學的展望，表觀遺傳學的治療進展。上述內容形成完整的表觀遺傳學知識結構體系。在教學過程中，通過有選擇地插入一些小型專題講座及相關的研究歷史背景資料的方式，介紹和強調學習和掌握表觀遺傳學的重要性，既活躍了課堂，又把課程從枯燥的理論講解中解放出來，同時激發了研究生的學習積極性，拓寬相關的知識面[2]。同時在教學過程中注重前沿進展內容的加入，如代謝、營養、環境等影響因素與表觀遺傳學的相關進展。

3 改革教學方法，培養研究生的創新能力

本課程所授課的對象是已具備一定自學能力和學習主動性的研究生，最重要的是培養他們科學地發現并解決問題的能力、準確表達個人思想見解的能力以及科研創新能力。本課堂選課人數一般在十人左右，因此課堂教學的特點在于小班授課。由于是小班教學，增加了教學的靈活性和增強了師生之間互動的可能性，師生之間的交流與溝通增多。因此在教學過程中采用教師課堂授課、學生參與研討、學生講授等多種教學方式，強調講授、研論、文獻調研、學術講座、論文報告、文獻綜述等多種方式并重的原則。在教學過程中，合理安排時間，讓研究生充分參與到教學的研討，結合自己的研究方向發表自己獨特的見解，闡述自己的學術觀點，這種教學方式為研究生迅速進入科研工作的角色奠定了堅實的基礎，增強了研究生創新能力的培養。發揮現代多媒體技術在教學中的重要作用，電子課件與板書相結合，同時采用圖片、視頻播放、動畫等多種方式的應用。倡導啟發式教育，摒棄灌輸式教學方法，講授基本理論知識的同時注意結合科研最新進展情況拓寬學生知識面，加強學生創新能力的培養，使學生的理論基礎和實踐應用能力同步得到提高，取得了較好的教學效果。對由于受學時限制而不能在課堂上詳細介紹的前沿內容可使用討論法，安排學生課后自學，啟發學生提出問題，通過課堂討論得到解決。還可以在部分單元結束后，要求研究生根據自己的專業方向，結合查閱最新的文獻資料，撰寫小專題報告，組織交流討論，以便鞏固學生所學知識，并進一步拓寬知識面。研究生不同于本科生，他們有強烈的求知欲孥，有較高的學習熱情，有較強的自學能力，所以在教學中倡導自學，組織討論，是因材施教、培養研究生創新能力的好方法。

4 多種考核方式結合，檢驗教學效果。

在研究生的考核方面，不僅僅局限于對課內授課內容的掌握程度，還可以采用綜述、專題小報告、PPT匯報、模擬課題設計等綜合考核方式，注重知識的活學活用和創新意識的培養，這樣才有利于研究生即打好廣博、堅實的理論基礎，又能其重組知識框架，只有這樣，研究生的創新意識才能夠得到增強。

研究生創新能力培養是受多因素復雜交錯影響的，要提升研究生的創新能力，既要保證培養研究生的客觀條件充足，又要發揮研究生的主觀能動性。研究生教育只有適應知識經濟時代的要求，才能不斷培養出符合社會需要的高層次創新型人才。表觀遺傳學既是目前迅速發展的學科和熱點領域，在生物醫學各種學科存在著千絲萬縷的聯系。它也是我們學院研究生重要的專業基礎課，對于培養研究生的創新意識，培養研究生發現問題、解決問題的能力具有重要的作用。只有在教學實踐中不斷地提高教師自身素質，調整教學內容，改進教學方法，才能達到預期目的。

參考文獻

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【關鍵詞】黑皮質素受體-1；基因；表型

【中圖分類號】R751【文獻標識碼】A【文章編號】1008-6455（2011）04-0541-01

不同人種皮膚和毛發顏色差異是人類最為顯著的特性之一。人類皮膚顏色差異是由遺傳學控制的。皮膚色素遺傳學研究已遠落后于人種皮膚顏色表型多樣性和原因學的研究，尤其是鼠皮毛色素調節基因逐個被研究發現（在已知127個鼠色素形成基因中， 有60個已被證實是人類種間同源基因[1]）已使狀況大為改觀。

人類皮膚色素形成具有半孟德爾遺傳模式，有多基因特性，由主要基因和修飾基因共同作用形成。色素形成是外界環境影響下的各種基因同步化相互作用的一大性狀[2]。

黑素合成生物化學和酶學方面的新發展使人們對黑素合成的遺傳調節過程有了深入的了解。 在眾多變異基因中，能影響人黑素細胞功能的有 MC1R （黑皮質素受體-1），P基因，和TYRP 及SILV基因家族成員等。其中，MC1R表達于人黑素細胞，MC1R和α-MSH和ACTH有親近性（α-MSH：α-促黑素細胞激素和ACTH均可促進黑素形成而使皮膚著色），一旦黑皮質素肽結合MC1R，就會刺激黑素的形成；而P基因及TYRP 和SILV基因家族成員可直接在黑素細胞內組裝并參與黑素小體形成。

在這里，我們主要強調MC1R與不同人種皮膚顏色形成的關系；MC1R關聯的不同人種皮膚顏色表型-基因型關系及MC1R基因序列多樣性譜三方面內容。

1 MC1R與不同人種皮膚顏色形成

MC1R編碼產生317個氨基酸的前蛋白，如同G-蛋白受體，MC1R有50個外顯子，不含內含子（無明顯生理學意義）。MC1R的N端有15NSTP18和29NQTG32兩個糖基化氨基酸殘基序列 ，N端糖基化有何作用還不明確。[3]黑皮質素家族還包括其他四種受體: MC2R（ACTH受體）; MC3R 和 MC4R（在中樞神經系統中發揮效應）及MC5R（主要調節鼠皮脂腺功能，可能同樣作用于人類）[4]。

MC1R 是鼠類基因座的人類同系物，而鼠類基因座已證實可調節鼠皮毛真黑素和褐黑素的形成。在人類，真黑素的合成依賴黑素細胞表達功能性MC1R及聯結α-促黑素細胞激素共同起作用。MC1R被認為是決定人類毛發和皮膚顏色的主要基因之一，已被成功克隆，同時發現其位點在16q24.3。

Cone等猜想MC1R多態性可能是造成人類皮膚顏色差異的主要原因。紅發白皮膚北歐人表現了MC1R 多態性，減低了皮膚曬黑的能力，卻增加了皮膚黑色素瘤和其他皮膚腫瘤的危險性[5]。與此同時，進入歐亞大陸的人類，因日光較少緣故，MC1R等位基因未產生明顯變異，所以這一人群未產生黑色皮膚。最近進行的MC1R啟動子功能模型研究對放松性選擇提出了質疑，認為亞洲人和歐洲人的一些MC1R變異是純化和多樣化選擇活動之結果[6]。也有研究說明人類于不同時間不同區域發生的皮膚顏色進化與自然選擇相關聯，它導致了深淺膚色表型不受約束的進化及包括可能的皮膚著色和失色過程。

2 MC1R基因型-表型與不同人種皮膚顏色

MC1R基因編碼區具有高度多態性，已有超過35個分隔位點被確定[7]。在亞洲人種，雖然功能性R163Q 位點變異較常見，但研究仍很缺乏。而編碼區外的基因序列變異不對不同人種皮膚顏色差異起作用。

對人類，家族，人口以及相關疾病研究表明了MC1R多樣性與一系列重復表型息息相關。例如R151C位點, R160W 位點和 D294H位點改變關聯著紅發白皮膚人種，因為大多數紅發人種不是這些相關基因改變的純合子就是復合雜合子。大約10-20% 的紅發個體因某一個等位基因改變，從而顯現出淺紅色皮膚外觀；對于已潛在喪失兩個功能性等位基因的個體則表現出金發碧眼外觀 。在英國北部，超過40% 的人口具有一些已知重要下調作用的等位基因，諸如如R151C 或 R160W。

另外，以此上這些具有下調作用的功能性等位基因的重要性為標準，其他一系列表型特征也很容易被聯想到，包括反復日曬產生燒傷趨勢超過曬黑趨勢;客觀評價雀斑和痣[8]以及黑色素瘤和其他皮膚腫瘤。

MC1R發揮日曬保護作用不是通過黑色素的數量及類型，可能借助其他無色素的機制起作用的，畢竟腫瘤產生于不同的細胞類型，它在日光誘導下發生，不會只是特異的單一細胞類型作用結果，如單一的黑色素細胞。在一項針對意大利人和美國人總體做的研究表明MC1R變異會使BRAF基因變異的黑色素瘤發生惡變的可能性增加。MCIR相關作用機制還不是完全清楚，需要進行更多研究去弄清內在關聯。[9]

3 MC1R基因序列多樣性譜

由于MC1R基因多樣性存在著程度問題，這也使早期的綜合性研究變得混淆不清。在早期的研究中，盡管說明了一些基因變異聯系著紅發白皮膚人種的表型，但不能指出最最有影響力的，且只證實小部分人群所具有的共有序列，對于遺傳方式仍不清楚。隨后的關聯性、家族性研究及功能性研究，只部分地認識了一些等位基因的作用，包括 R151C, R160W 和 D294H 及其他一些等位基因。有很多仍無法弄清; 另外，家族性研究也提示V60L模型是一種緩慢作用的功能下調性等位基因，而對于其他一些等位基因，諸如D84E,其功能狀態依然不清楚且有矛盾的結果產生[10]。

4 結語

總之，人類皮膚顏色的遺傳學研究尚處于初步探索階段，需進一步了解影響皮膚顏色表型基因位點多態現象的水平，效應及其相互作用。對MC1R研究，今后的重點依然是是確定其哪一等位基因起顯著意義，更多的聯系其有價值的表型特征，進一步擴大皮膚顏色遺傳學領域的研究價值。

參考文獻

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關鍵詞：光遺傳；抑郁癥；抑郁小鼠模型

中圖分類號：F24文獻標識碼：Adoi：10.19311/j.cnki.1672-3198.2019.19.041

抑郁癥是一種會嚴重危害人類身心健康的精神疾病，是當今社會中很常見的一種情緒障礙綜合征。抑郁癥患者會呈現出焦慮，自卑，厭世，心境低落等癥狀，重者甚至產生自殺傾向。隨著社會壓力的不斷增大和現代生活節奏的加快，抑郁癥發病率也呈現快速上升的趨勢。據統計，約13%-20%的人曾有過抑郁的體驗，人群中的抑郁癥終生患病率更高達6.1%-9.5%之多。抑郁癥已然成為世界常見的疾病之一，研究降低其發病率的科學方法成為了迫在眉睫的事情。抑郁癥的生物學機制以及治療手段都需要進一步的科學突破，近年來光遺傳學的快速發展，為我們提供了研究神經生物學機制的強有力工具。本研究利用光遺傳學技術設計實驗來研究與抑郁癥發病相關的腦區，從而為抑郁癥發病機制理解及治療提供更好的幫助。

1抑郁癥

作為一種嚴重的精神疾病，科學界提出幾種抑郁癥的發病機制假說，包括幾點：

（1）神經環路假說：該假說認為抑郁癥是由多個腦區參與的，綜合調控發生的。負責情感，決斷，賞罰的腦區對抑郁癥的關系尤為密切。

（2）單胺類神經遞質功能低下假說：多巴胺，去甲腎上腺素和五羥色胺等單胺類物質參與了精神活動，情緒反應，體溫調節等生理反應。該假說認為患者腦內的單胺遞質水平，即5-羥色胺，多巴胺和去甲腎上腺素神經遞質系統功能的低下導致了抑郁癥。

（3）神經營養缺乏假說：在神經發育過程中的生長因子對成年大腦的可塑性起著重要的作用。其中作為中樞神經系統中分布最廣泛，含量最多的腦源性神經營養因子對神經元的生長，分化和損傷修復功能起重要作用。

類似于舍曲林，帕羅西汀和氟西汀的藥物進行的藥物治療和其他形式的治療手段是目前常見的抑郁癥治療方法，雖然這些治療方法的見效較快，但是由于抑郁癥具有高復發性和隱匿性，患者服用的不少藥物都有不良副作用。

2光遺傳學技術

光遺傳學，是將光敏感離子通道蛋白神經元表達，并利用特定波長的光照激發從而實現對目標對象精細調控的學科，即通過操縱神經元來興奮或抑制靶細胞和靶器官。該技術可以對哺乳動物大腦組織進行無損傷的操控，它具有目的性強、精準度高，細胞特異性強等特點。是由2005年Boyden等人證明光刺激綠藻視蛋白可以使神經元產生應答而發現的技術。近年來，光遺傳學在復雜的生物學機制探究，尤其是腦科學等領域的研究中得到了廣泛的應用。2011年，NatureMethods將光遺傳學技術譽為了21世紀神經生物學中最具影響力的技術。

光敏感蛋白在光遺傳研究中發揮著重要的作用，它是光遺傳學的主要工具，被發現于單細胞微生物如綠藻、單胞菌的視蛋白中。光敏感蛋白根據不同的效應可以分為興奮性光敏感蛋白和抑制性光敏感蛋白兩種。視紫紅質-2（ChR2）是目前最常用的興奮性光敏感蛋白，它在被藍光激活后，陽離子內流使細胞去極化，產生動作電位，提高興奮性。視紫紅質（NpHR）是一種常見的抑制性光敏感蛋白，在被黃光激活后會使細胞膜超極化，從而抑制細胞的興奮。

光遺傳學技術自問世來，廣泛應用于動物行為研究，比如用光遺傳學技術使果蠅體內的多巴胺大量釋放，在斑馬魚的軀體感覺神經元的實驗過程中，也發現光照可以使其產生逃避的游泳活動等。在神經生物學領域尤其是精神類疾病等研究中的應用也非常廣泛，可以用于研究焦慮，藥物成癮，恐懼和抑郁癥等領域。利用光遺傳學技術，有研究發現中腦腹側被蓋區（VTA）的神經元可以讓小鼠表現出糖水偏好減少和社交逃避等特征；光遺傳學刺激內側前額葉（mPFC）可以讓“易感”小鼠產生抗抑郁的作用等結論，大量研究表明光遺傳學技術在抑郁癥研究中可以發揮重要的作用。

3光遺傳學探究抑郁癥發病實驗設計

3.1腦區選擇

（1）前額葉皮質：前額葉皮質（PFC）是指覆蓋大腦額葉前部表面的皮層結構。在社會認知的領域中，PFC對情緒認知，社會推理，心理和決策推斷等問題產生了重要影響。現代研究表明，前額葉皮質功能的異常與抑郁癥相關。

（2）中腦腹側被蓋區（VTA）：中腦腹側被蓋區產生的多巴胺可能參與了抑郁癥的發生。對多巴胺能神經元進行特異性的激活或者抑制，可以較為明顯的影響實驗動物的抑郁表現。

（3）伏隔核：伏隔核參與了獎賞環路的組成，伏隔核的損傷與缺失行為的發生和發展有著必然關系。科學家們認為慢性應激是會導致抑郁癥發病的最主要的因素之一，會最終引起獎賞系統GABA能神經元受損。

（4）杏仁核：杏仁核與內分泌調節和自主神經活動的調節有著非常密切的關系，因為杏仁核有可能是機體的情緒整合中樞，可以將感覺信息投射到皮層、下丘腦和腦干諸核團，形成意識水平的情緒反應。

3.2前期準備

選擇同批次相同重量的同齡成年小鼠共100只小鼠，其中對照組20只小鼠，實驗組80只小鼠。實驗組共分為16組，四種腦區，每種腦區又分別注射興奮性光敏感蛋白ChR2和抑制性光敏感蛋白NpHR，同一腦區注射相同的光敏感蛋白的小鼠又分為兩組進行不同方式抑郁癥小鼠建模。對照組注射攜帶GFP的病毒載體。各組小鼠在相應腦區注射相應視蛋白后，按腦區分類將光纖分別埋入DP，MO，VTA，PFC四種腦區注射上方附近，術后對小鼠進行單籠飼養，約3到4周后開始進行行為學試驗。3.3建立抑郁癥研究的模型

（1）糖水偏好模型。將各組小鼠放在一系列的溫和應激之下，使其受到不可預知的刺激。這些刺激包括使小鼠挨餓，不定時潑灑冰水，束縛小鼠等等。在經過三周的溫和刺激之后，觀察小鼠對糖水的偏好性并同對照組對比，小鼠對于糖水的偏好明顯降低，并同時出現攻擊力降低，毛色變差等現象。判斷為小鼠的缺乏，成功建立抑郁癥基礎模型。

（2）公鼠造模。經過篩選，選擇進攻能力較強的大鼠（大白），和進攻能力很弱的小鼠（小黑）進行實驗。將小黑作為入侵鼠放在大白的籠子中，并讓他們進行身體接觸，每天15分鐘左右。在每天其余時間內將大白和小黑用帶小孔的透明隔板隔開，讓小黑可以看到聞到大白，從而對小黑造成心理陰影。十五天后，將大白盒小黑共同放入社會交互實驗箱中進行社會交互實驗，試驗箱中分為了角落區和交互區。分別在交互區有大白和無大白的情況下，觀察小黑在角落區和交互區停留的時間多少，成功建立抑郁癥基礎模型。

3.4利用光遺傳學技術操縱興奮或抑制小鼠的腦區

分別用公鼠造模和糖水偏好兩種基礎模型得到的抑郁小鼠進行光遺傳學操作實驗。已注射光敏感蛋白的實驗小鼠，可以在適合光刺激情況下興奮（ChR2）或抑制（NpHR）該腦區的神經元，從而實現對該4個腦區的調控，探究相應腦區的興奮或抑制對抑郁癥小鼠模型行為的影響。

將不同的抑郁癥建模方式得到的小鼠，選擇固定頻率對相應腦區進行光刺激一段時間，對于“公鼠造模模型實驗組”，統計實驗小鼠在角落區和交互區停留的時間比例，對于“糖水偏好實驗組”，觀察統計實驗小鼠對糖水的喜好程度，根據光刺激前后小鼠行為變化來推斷抑郁癥發病相關的腦區。

4總結與展望

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同聲傳譯實驗室主要由3個單元組成，分別是主席單元、翻譯單元和代表單元。主席單元主要是教師單元，而翻譯單元和代表單元主要是學生單元。主席單元除了教師席還有發言席，主要用于模擬會議發言人發言；翻譯單元主要是八個譯員間，每個譯員間設有兩個譯員席，可以滿足兩名譯員輪流交替翻譯；代表單元是指模擬會議中的與會代表席位，每位代表可通過操作桌面的終端設備，根據自己的需要選擇收聽發言人或某個譯員的翻譯，此外，實驗室內均裝有球型攝像頭，可將實驗室內發言場景，通過此攝像頭傳輸到每一個譯員席位桌面的電視屏，有助于譯員同聲翻譯。

同聲傳譯實驗室有四大功能，包括語言教學功能、自主學習功能、考試功能及同傳會議功能。

（一）語言教學功能

（1）聽力理解；（2）自主閱讀；（3）電話對話；（4）配對討論；（5）小組討論；（6）同聲傳譯

（二）自主學習功能

（1）VOD視頻點播功能；（2）自助考試；（3）網絡課件點播；（4）AOD音頻點播功能；（5）電子作業功能

（三）考試功能

（1）自動口語考試、聽力考試、寫作考試、及隨堂測試功能；（2）自動閱卷

（四）同傳會議功能進行模擬同聲傳譯會議。

同聲傳譯實驗室創造了圖文并茂、聲像同步的逼真語言環境，為學生進行有效的口譯實訓提供了良好的平臺。主要具備操作方便、資源廣泛和功能強大等特點。

（一）操作方便。同聲傳譯軟件的教學模式可由老師自主選定，學生在自主學習時也可以隨機選擇學習內容。進行口譯訓練時操作非常方便。

（二）資源廣泛。同傳實驗室可以聯網，學習資源豐富，極具時代感。

（三）功能強大。同聲傳譯實驗室語言教學功能齊全，傳統與現代相結合，“磁帶+視頻+光盤+互動+講解”元素有機組合，有利于學生展現口譯的即時性和現場性。

二、口譯與口譯教學的特點

口譯具有及時性和個體操作性的特點，口譯人員也要有較強的語言綜合能力和心理素質。口譯的這些特點決定了口譯教學具有技能性、真實性和科學性的方法和特點。“口譯是一種通過口頭表達形式講所聽到的信息，準確而快速地由一種語言轉換成另外一種語言，以達到傳遞與交流信息的目的的交際行為，是人類在跨文化，跨民族交往活動中所以來的一種基本的語言交際工具。”（梅德明，2014：6 ）

口譯主要具有以下特點：

（一）口譯具有即時性。譯員需要在短時間內對聽到的口頭信息進行分析、理解、表達，因此它要求譯員具有較高的應變能力和流利的表達能力；不能求助于外部資源，譯員幾乎一切要靠自己解決口譯現場出現的問題。所以譯員必須做好譯前準備工作，包括了解講話人的背景、講話的主題和講話內容可能涉及的專業知識等等。

（二）口譯具有個體操作性。在口譯現場出現的任何突發狀況，都需要譯員獨自處理，一般不能尋求他人幫助或者查閱相關資料。

（三）口譯要求譯員有較強的語言綜合能力。譯員應掌握英漢兩種語言的基本特點和互譯規律，具備良好的英語修養和扎實的漢語基本功以及聽、說、讀、寫、譯等綜合語言能力。扎實的語音基本功，豐富的詞匯量，敏銳的聽力，豐富的語言文化背景知識和靈活的表達能力都是譯員必備的基本素質。

（四）口譯要求譯員有較強的心理素質和較高的抗壓能力。由于口譯活動多在非常正式的場合進行，譯員往往在這種嚴肅的場合有很大的心理壓力，若這種心理壓力持續并且不能及時克服的話，會影響譯員的正常發揮。因此譯員要學會突破心理障礙，戰勝自我，培養良好的心理素質。

口譯教學是在理解原文的基礎上，通過結構和邏輯分析，用另外一種語言表達的基本過程。由于口譯的及時性、現場性和個體操作性等特點，要求口譯員不僅要有寬廣的知識面、較高的英譯互譯能力、豐富的專業知識和高度的責任感，還要具備較強的理解、記憶和表達能力。口譯的這些特點也決定了口譯課有自己獨特的教學方法和特點。

（1）技能性

“口譯教學的先決條件是學生已經有比較好的雙語基礎，口譯教學的主要目的并不是提高雙語技能，而是教授如何進行口譯，讓學生掌握口譯技能。此外，國內外口譯研究者對口譯模式進行的研究均認為口譯訓練應以口譯技能（技巧）為主”（仲偉合2 0 07： 3 1 ）。因此，口譯教學應該注意講練結合，讓學生通過口譯材料的練習掌握口譯技巧。口譯課中主要進行口譯記憶、口譯筆記、數字口譯等技能的訓練。

（2）真實性

由于口譯教學以訓練學生的口譯技能為主要目的，所以口譯教學要創造接近真實的口譯場景，使用口譯現場的原材料進行訓練，例如演講、大會發言、新聞會、商務會談等。口譯的錄音和視頻材料盡可能以真實場景為背景，同時保留一定的背景噪音，以利于提高學生的聽力水平。

（3）科學性

口譯訓練應符合循序漸進的原則，練習時從易到難、由淺入深，做到口譯訓練的科學性。在進行口譯練習時，一般先練習陪同口譯，其次練習交替傳譯，最后進行同聲傳譯，這幾種口譯難度逐步遞增。此外，“訓練材料應該由一般性的材料開始，逐步過渡到專業性較強的材料，這樣學生才不至于一上來就被陌生的專業術語所嚇倒，從而產生畏難情緒；材料的長度應該逐步遞增，由一分鐘左右的講話逐步增加到五分鐘左右的講話”（劉和平2 0 0 5 ： 47 一48 ）。另外，如果是英漢雙向口譯訓練材料，應先進行英譯漢練習，后進行漢譯英練習，因為英譯漢訓練時，譯文是我們的母語，學生的大腦思維會更活躍，表達更順暢，同時可以從英語原文中學到更地道的表達，從而提高了漢譯英訓練質量。

三、同聲傳譯實驗室在口譯教學中的應用

同聲傳譯實驗室可以實現36名學生同時進行口譯訓練，而傳統的教室每次只能有一名學生說話。因此在同聲傳譯實驗室中進行口譯教學，不僅節約了時間，也提高了口譯練習的效率。同時，學生在同聲傳譯實驗室可以進行口譯理解、記憶、表達技能訓練和口譯現場模擬，通過大量的口譯練習，學生口譯能力有了很大提高。

（一）口譯理解技能訓練

同聲傳譯實驗室中的教學軟件有聽力理解模式，在聽力理解模式下，學生可以進行口譯理解技能的訓練。而聽力是口譯理解的基礎，學生只有能聽得懂，才能譯的出。在進行聽力理解訓練時，可以采用以下三種方式進行練習：首先，聽句子，進行影子訓練，即同步跟讀所聽到的內容，以加強對原文的理解；其次聽段落，復述所聽到的主要信息，在理解原語的同時，加強了短時記憶力的訓練；最后聽段落，口譯該段落的主要信息，能用譯入語把原語的基本信息再現出來。通過口譯理解技能練習，學生不僅提高了理解能力，還增強了短時記憶能力，進而提高了口譯能力。

（二）口譯記憶與筆記技能訓練

通過同聲傳譯實驗室的系統軟件和網絡設備，以語音輸出形式給學生提供語音材料。學生可以利用形象化記憶、提綱式記憶和推理式信息組合記憶等方式記憶原文的主要內容。進行記憶訓練時可以以由簡入難的方式進行，由原語復述過渡到目的語復述。同時，還可以利用同聲傳譯實驗室語音設備的快進、放慢等功能訓練學生的口譯筆記，幫助學生找到一套相對穩定的、可行的筆記符號系統，從而提高口譯筆記能力。

（三）口譯表達技能訓練

通過同聲傳譯實驗室教學軟件中電話對話和小組討論模式的應用，可以強化口語表達技能訓練。利用教學軟件中電話對話模式，可以把學生分為兩人一組，進行對話口譯。或者通過小組討論模式，把學生分為若干組，例如四人一組的商務談判，四名同學分別代表甲方及甲方的口譯員，乙方及乙方的口譯員進行練習。分角色模擬口譯訓練可以有效的提高學生的表達技能，整個訓練過程可以進行錄音，學生之間也可以相互聽評，從而有效地提高口譯能力。同時，學生也可以在小組內進行演講比賽，提高了學生的公共演講能力和表達能力。

（四）口譯現場模擬訓練

同聲傳譯實驗室的主要功能就是可以模擬國際會議，進行口譯現場模擬訓練。在同聲傳譯模式中，一名學生可以做國際會議的主席，即發言人。有十六名同學可以進譯員間進行輪流交替翻譯。坐在代表席的同學可以收聽譯員間同學的翻譯。這種模擬演練，使學生有身臨其境的感覺，提高了學生的心理素質。模擬結束后，老師和學生進行分析總結，在仿真環境下，不僅讓學生熟悉更多的國際會議、談判、新聞會，而且能有效提高學生的口譯水平。

篇6

1黑麥屬植物的分類與分布

黑麥屬(SecaleL.)植物屬禾本科(Poaccae)小麥族小麥亞族(TriticeaeDumort.)，許多學者對其分類存在不同觀點。作者認為較合理的分類方法是將黑麥屬劃分為三大類型4個種。第1類為一年生異花授粉植物類型，包括1個栽培種黑麥(SecaiecereaieL.);第2類為一年生自花授粉植物類型，包括瓦維洛夫黑麥(SecaievaviloviiGrossh)、林地黑麥(SecalesylvestreHost)2個野生種；第3類為多年生異花授粉植物類型，包括1個野生種Seca/estrictumL.,即山地黑麥（Secalemontanum)。而世界上兩大種質資源庫GRIN和PGRC在此基礎上，又將SecalecerealeL.分成8個亞種，將Secalestric?tumL.分成5個亞種。在我國新疆發現一種雜草型黑麥,其分類地位屬S.cerealesubsp.Segetale。

黑麥起源于歐洲南部至亞洲西部，野生種的分布從摩洛哥的阿特拉斯和西班牙的西拉內華達山脈到意大利、南斯拉夫、希臘、黎巴嫩、土耳其、伊朗、伊拉克、阿富汗一帶。栽培種普通黑麥主要在歐洲、德國、瑞典、波蘭、俄羅斯直到西伯利亞以及北美洲的加拿大和美國，我國僅在西北、西南和東北山區或高海拔地區種植。

2黑麥屬植物的遺傳學研究

2.1黑麥屬染色體的C分帶核型所有黑麥屬植物都是具有R染色體組基數為7的二倍體，7條染色體一般為近中染色體。Gill等人(1974)和Mukai(1992P等人對添加在普通小麥“中國春”中的帝國黑麥染色體進行C分帶研究，結果發現黑麥的全部7條染色體均具有明顯的特征帶（下圖）。每條染色體短臂的末端都具有很強的C帶，著絲點部位也都表現明顯的、但弱于短臂末端的C帶；除4RL、5RL和6RL末端C帶帶紋較弱外，其余4條染色體長臂末端，即1RL、2RL、3RL和7RL末端與短臂末端帶紋相似,具有很強的末端C帶。在全部7條染色體短臂上，除1RS具有很強的插人C帶外，其余6條短臂染色體上均沒有明顯的插人C帶帶紋;在所有長臂染色體上，除3RL上無明顯的插入C帶帶紋外，其余6條長臂染色體上都有1~4條不等的帶紋。根據存在于黑麥染色體上的特征C帶帶紋，可用來鑒定小麥背景中的黑麥染色體及易位染色體。該技術目前已得到廣泛的應用。

2.2黑麥DNA的重復序列DNA重復序列是高等真核生物基因組的一個顯著特征，小麥族植物基因組中的中度和高度重復序列含量達70%以上，黑麥基因組DNA重復序列含量更高，達92%。其中26%的重復序列能同時與黑麥、大麥、小麥和燕麥雜交，26%的重復序列能與大麥、小麥和黑麥雜交，而不能與燕麥雜交，18%的重復序列僅與小麥和黑麥雜交,為黑麥專化者占30%。黑麥中已鑒別出許多重復序列家族，根據其重復單位的長度將其分為120bp,480bp,610bp,630bp家族、2.2kb家族、5.3-H3家族、R173家族、Ecol90I家族和RXX630家族等。這些重復序列有些是黑麥基因組特有的，有些是不同物種基因組間共享的。如PSc200是黑麥特異端部/亞端部串聯重復序列⑴，可有效鑒別黑麥、小黑麥雙二倍體（圖2)、添加系、代換系中的黑麥染色體及易位染色體的黑麥片段；PScll9.2是黑麥基因組與小麥基因組共有的，黑麥7對染色體的端粒和染色體臂內都有分布位點，小麥中主要分布在1-7B、4A、5A、2D、3D、4D和5D染色體的端粒和染色體臂內，常用于區分小麥的B基因組。研究還發現黑麥染色體端部強大的C分帶帶紋均為DNA高度重復序列區。

2.3黑麥與小麥染色體間的部分同源關系確定小麥與近緣物種染色體間的部分同源關系，主要通過3種途徑：染色體代換補償測驗、中期I部分同源配對分析和遺傳圖。Sybenga(1983)和Zeller(1983)根據黑麥染色體代換補償小麥染色體的結果，發現黑麥染色體1R、2R、3R、5R和6R分別與普通小麥的1、2、3、5和6部分同源群有密切的同源關系；由于在進化過程中4R與7R間發生過易位，因此4R和7R與小麥第4和第7群具有局部的部分同源關系。Naranjo等人(1991)利用phlb突變體與黑麥端體、黑麥易位系T242W(2RL/6RL)、T282W(5RL/7RS)和T501W(4RL/5RL)雜交，對其雜種F,染色體配對進行分析，發現1RS與1AS、1BS和IDS配對，1RL與1AL、1BL和1DL配對；2RL與2AL、2BL和2DL配對；3RS與3AS、3BS和3DS配對；4RS與4BS和4DS配對，但不與4AS配對；5RS與5AS、5BS和5DS配對，5RL與5AL及4BL、4DL的端部片段配對;6RL可與小麥第6群、第7群和第3群染色體長臂配對，但頻率較低;7RS可與5BL、5DL和7BS配對，不與7AS、7DS配對。

3黑麥優良基因向小麥中的轉移

3.1黑麥的優良基因黑麥具有許多優良性狀，

是小麥品種改良的重要基因資源。黑麥抗寒、抗旱、耐瘠薄，對鋁、硫和銅離子的抗性強，且對土壤酸堿性的反應不敏感。除高抗三銹(條銹病、葉銹病和稈銹病)和白粉病外，對小麥遺傳花葉病、黑穗病、全蝕病、眼斑病、蟲害病、大麥黃矮病、葉斑病、紋枯病、雪腐病、線蟲和赤霉病等病害都有較強的抗性。在抗病性改良上，利用較多的是黑麥對白粉病、病毒病、葉枯病和三銹病的抗性。黑麥是小麥育種中抗白粉病的主要抗源之一。在已鑒定和命名的50多個小麥抗白粉病基因中有4個來自黑麥，即和Pm20，它們分別位于黑麥的2R、1R、1R和6R染色體上。其中，1R上的Pm8由于與y79、Lr26、Sr31及其他有利黑麥生長的基因緊密連鎖，曾在小麥育種中發揮過巨大的作用。此外，黑麥還表現大穗、多小穗、籽粒賴氨酸和蛋白質含量高等優良性狀。

3.2黑麥優良基因導入小麥的途徑

3.2.1小麥-黑麥雙二倍體小麥-黑麥雙二倍體是黑麥有益基因向小麥轉移的橋梁，也是創造小麥-黑麥異附加系、異代換系、異易位系的基礎材料。Wilscm(1876)第1次報道了小麥與黑麥雜交成功；Rimpau(1891)獲得了首個天然加倍的八倍體小黑麥；Muntzing(1939)獲得了首個人工加倍的八倍體小黑麥;0'Mara(1946)獲得了硬粒小麥-黑麥雙二倍體即六倍體小黑麥;Jankins等人（1969)選育出了第1個商用注冊六倍體小黑麥品種“Rosner”；CIMMYT(1970)選育出了矮稈、早熟、高產的六倍體小黑麥“Armadillo”；鮑文奎院士1951年開始研究八倍體小黑麥，選育出小黑麥2號、3號、勁松5號、黔中I號等優良品種，并擁有4700份小黑麥品系；蔣華仁等（1987)又合成了普通小麥與雜草黑麥、山地黑麥和非洲黑麥新型八倍體小黑麥；亓曾軍等(2000)合成了荊輝1號和荊輝2號八倍體小黑麥，Zhou等人選育了六倍體小黑麥“Fenzhi-1”。迄今，人們已合成了幾乎全部黑麥種的雙二倍體。

3.2.2普通小麥-黑麥異附加系、異代換系小麥異附加系、異代換系是實現外源基因轉移，研究外源基因表達及基因定位的優良材料，又是創造異易位系的重要資源。Leighty和Taylor(1924)發現附加5R染色體的“毛頸”小麥;Florell(1931)報道了第1個真正的小麥-黑麥附加系；0'Mara(1940)獲得了3個小麥-黑麥異附加系；馬緣生等(1985)選育出1R二體異附加系。劉宏偉(1986)鑒定出7R二體異附加系和1R、4R、6R和7R的單體異附加系；李愛霞等人利用荊輝1號雙二倍體選育出5個二體異附加系(分別添加1R、2R、R3、5R和R7)。目前得到的整套小黑麥異附加系有ChineseSpring-Imperial,Holdfast-KingI,ChineseSpring-KingII,Kharkov-Dakold以及中國春-澳大利亞南部黑麥附加系等。

Katterman(1938)首次獲得了5R/5A代換系；Mettin(1973)等選育了1B/1R代換系；Riley(1958)將1R與1A代換；Koller(1976)選育出了小麥山地黑麥異代換系7A/7R和7B/7R;Sears(1983)選育出2B/2R和2D/2R異代換系；裴新梧等(1995)選出了抗鎊病的4D/4R異代換系；李振聲等（1987)選育抗條銹病異代換系；李集臨（2002)獲得1R/1D,1R/1A，5R/5A和6R/6A代換系。

3.2.3普通小麥-黑麥異易位系小麥-黑麥易位系是目前將黑麥基因導人小麥最為理想的方式。易位系可自發產生，也可通過電離輻射、Ph控制系統、殺配子染色體及組織培養等方法產生。生產上廣泛應用的1BL/1RS和我國特有小麥種質“矮孟牛”具有的相互易位T1RS-7DL/I7DS-1BL,均為自發易位產生。據不完全統計，自發產生的易位有20多個。Driscoll和Jensen(1963)通過X-射線照射獲得了4B和5R易位，目前經過輻射已創造了多個易位系。Koebner(1986)利用phlb突變體誘導得到了lRS.lDS;Friebe等(1990)在組織培養材料中鑒定出2BS.2RL;Endo(1993)利用殺配子染色體創造了一批小麥-黑麥易位系。

4黑麥有益基因在小麥改良中的應用

黑麥種質資源在小麥育種中發揮了重要作用。1BL/1RS易位系是世界小麥育種史上利用最成功的例子，它將黑麥1RS上的抗病基因ftn8、yi9、Lr26和Sr31及與豐產性、適應性有關的基因轉移到了小麥遺傳背景中。由于1RS能夠很好地補償1AS、1BS和IDS缺失引起的負效應，因而在世界小麥生產上發揮了重要作用。據報道，在世界范圍內至少有400多個小麥品種(系）涉及1R易位或代換，有200多個小麥品種有1BL/1RS血緣[7]。較早引人我國的1BL/1RS小麥品種是以洛夫林為代表的一批小麥-黑麥易位系。1BL/1RS品種有3個來源，分別是日本的Salmon、德國的ZOT_ba和Salzmundew。在我國小麥育種中應用的主要是洛10(Lovrinl0)、洛13(Lovrinl3)、山前(Predgomi-a2)、高加索、阿芙樂爾(Aurora)，均為1BL/1RS易位系；目前的推廣品種中1/2以上帶有1RS/1BL血緣。楊足君（1999)對我國主要麥區的小麥品種進行了細胞學和醇溶蛋白鑒定，發現69%的材料屬1BL/1RS易位系；郝晨陽等（2005)對我國育成品種初選核心種質1680份進行了分析和評價，發現育成品種中大量含有1B/1R易位系血緣。可見，1B/1R易位系在世界和我國小麥生產中發揮了非常重要的作用。

盡管1BL/1RS易位系在小麥育種中作用巨大，但也帶來了一些問題，如1BL/1RS易位系小麥對白粉病、銹病的抗性減弱乃至消失；小麥面包烘烤品質變劣，主要表現為面團粘性增大和面筋強度減弱這些問題有待進一步研究。

篇7

一、pgd的研究進展

1．取材途徑：pgd是指在胚胎移入到宮腔之前的診斷。其獲取診斷標本的途徑主要有：（1）獲取或卵子進行診斷，（2）獲取植入前的胚胎細胞進行dna或染色體分析。

受精前取配子進行診斷的報道，目前尚不多。這" 種方法關鍵在于如何完成或卵子的遺傳分析，同時又不影響其受精能力。已有報道，用流式細胞儀分離x、y，用于植入前篩選胎兒的性別。而用卵子進行pgd，主要是利用第一極體或第二極體的遺傳學分析，間接推斷卵子正常與否。現在，可以利用極體的dna進行單基因病的診斷，也可以用核轉換技術，將極體由間期激活成中期，再用cgh技術分析其所有的染色體組成，或直接對極體的某些染色體進行fish分析，診斷這些染色體有無數目異常。但是，用極體分析來推斷卵子的基因組或其染色體結構和數目，并不能完全反映卵子遺傳組成的真實情況，有時也必須同時分析第一極體和第二極體，才能判斷卵子的染色體有無異常。

卵裂球活檢是現在pgd取材的主要途徑。一般選6～10細胞期的卵裂球，此期的細胞具有全能分化的潛能，取出1～2個細胞，不會影響胚胎的發育。

囊胚期活檢是pgd診斷的另一潛在途徑。這種方法是在體外將受精卵培養到囊胚期，取其滋養外胚層細胞進行遺傳分析。因為不影響內細胞團，故不會累及胚胎發育。受培養技術的限制，多數胚胎不能在體外很好地發育到囊胚期。因此，無法獲取囊胚期細胞進行pgd。最近，veiga等（1999年）改進了培養方法，在體外培育后，可達到囊胚期的胚胎占39.3%，推測囊胚期活檢有望成為一種有效的取材方法。雖然取一定數量的囊胚期細胞不會影響胚胎的正常發育,但內細胞團和滋養外胚層細胞的遺傳構成并非完全相同，故用滋養外胚層細胞進行pgd有可能造成誤診。診斷時分別用幾個細胞分析比用單個細胞診斷的方法更" 好，可以降低誤診率。

2.基因病診斷: 目前可診斷的單基因病包括地中海貧血，纖維囊性化，脆性x綜合征，以及和性連鎖遺傳病有關的性別診斷等，可診斷的病種數目在不斷增加。所用的方法主要是基于pcr技術的dna分析，通過檢測單細胞靶基因的數目及結構有無異常加以診斷。常規的pcr技術易受實驗條件的影響，故從90年代后期開始，熒光pcr，多重pcr，巢式pcr技術用于pgd診斷的報道逐漸增加，有效地提高了診斷率。

染色體數目異常的診斷有兩種途徑：用傳統的染色體計數及用熒光pcr進行多態位點定量分析。熒光pcr是近年發展起來的新技術，敏感度很高。對多細胞水平的定量分析來說，它是一種穩定可靠的技術，但因選擇性擴增的緣故，單細胞的定量分析中有25%的診斷結果不可靠。熒光pcr已用于21三體的植入前診斷。隨著熒光pcr定量檢測技術的廣泛應用，現正在開發一種同步檢測技術，以便實時測定熒光pcr的擴增效果,并進一步提高其診斷的可靠性，促進該技術的臨床應用。

在基因病診斷以及染色體病診斷的過程中，主要的限制因素之一是，如何獲取滿足診斷需求的dna。解決的途徑主要靠wga。wga目前常用的方法有兩種：簡并寡核苷酸引物pcr（degenerated oligonucleotide primed pcr, dop-pcr）法及擴增前引物延伸法（primerextension preamplification,pep）。用wga法能夠無選擇偏見地擴增整個基因組。從理論上講,任何基因都能從wga的產物中檢測出來。同時也可將信息保存起來。目前，wga尚未廣泛用于臨床，但是對多基因病診斷的要求及cgh技術的發展，勢必要求wga技術不斷地完善，并推動其臨床應用。

3.染色體病的診斷:在植入前遺傳學診斷領域，染色體病的診斷占了很大的比例。cgh和間期細胞核轉換技術的應用,標志著染色體分析技術可能有了一種通用的程序。然而，fish仍是目前診斷染色體病的主要方法。主要用來診斷非整倍體，特別是13、18、21、x和y染色體的數目異常。用雙色、多色探針可以在單細胞水平診斷染色體數目畸變。既可以用不同的探針同步雜交單一細胞核，也可用重復雜交同一細胞核的方法完成診斷。染色體結構異常，例如平衡易位攜帶者可用其卵裂球或極體進行pgd。羅氏易位的診斷可用商售的探針進行。最常見也最難診斷的是相互易位，需要進行染色體涂抹，同時還要進行著絲粒及近端粒探針雜交以確定染色體斷裂位點。由于斷裂位點的不可預見性，相互易位很難制備商售的探針。因此，相互易位的診斷耗時、費力，操作也比較困難。

用常規fish僅能分析有限的染色體，對相互易位等復雜畸變不易診斷。因此人們用早熟染色體凝集技術將間期細胞核轉換成中期細胞核，然后分析其染色體數目及結構有無異常，以達到診斷目的。verlinsky將極體或卵裂球注入到去核卵子或去核的受精卵中，電刺激使之融合，利用胞質內的因素促使極體或卵裂球轉化成分裂狀態。這樣得到的染色體可用于染色體涂抹，多色fish或光譜核型(sky)分析，因對核轉變技術要求高、耗時、易受制備因素的影響，也受到倫理因素的制約，使其發展受限。cgh是另一種很有希望的診斷染色體異常的技術。用wga方法獲取基因組dna，然后用雜交技術結合計算機分析可診斷任何超過20 mb的染色體區域的拷貝數有無異常，從而診斷染色體病。影響cgh的主要因素是如何得到足夠的dna。一般要求100 ng～1 μg dna，大約相當1萬個細胞所含的dna量。應該強調的是，用wga獲取足夠數量dna的同時，還要確保得到的dna是準確的復制品。制約cgh臨床應用的另一因素是診斷時間必須縮短，目前的診斷時間大約是7 d左右，尚不能滿足臨床的需要。

4.其他方面:pgd除了用于遺傳病診斷之外，也可應用于研究人類基因，特別是一些有特殊遺傳缺陷的基因，在發育早期的表達。這對于了解人類胚胎的正常發育有重要意義。例如對pgd技術用于人類腫瘤易感綜合征的易感性分析。與腫瘤有關的各種抑癌基因與細胞周期的調節、細胞凋亡的途徑及胚胎分化的時機和極性都有密切的關系。sutterlin（1999年）等用巢式pcr和單鏈多態性分析技術，對單細胞進行視網膜母細胞瘤的易感性分析，在植入前確定胚胎未來發生腫瘤的可能性大小，為pgd應用于人類胚胎基因表達的研究開辟了暫新的途徑。此外，delhanty等發現，體外受精的胚胎存在染色體嵌合現象，雖然還不清楚自然受精的胚胎是否也有同樣問題，但是這些發現無疑對改進診斷程序設計，甚至在將來改善體外受精的成功率都有重要意義。

二、存在的問題與解決方法

1.等位基因脫失:等位基因脫失（allele drop-out, ado）是影響基因病診斷的主要因素之一。發生率約為5%～20%。它是指兩個等位基因只能擴增出1個，另1個不能擴出或擴增的數量有限，達不到診斷的水平。這對于單一基因異常所致的遺傳病如常染色體顯性遺傳病的診斷有較大影響，容易導致誤診。單純應用pcr技術診斷胚胎的性別，也易因ado而造成誤診。用多重pcr方法擴增致病基因及其緊密連鎖的多態片段，可以降低因ado而造成的誤診率。此外，改進樣本的制作及用熱啟動pcr，也可減少ado的發生率。roy（1999年）發現，用設計好的引物，嚴格的操作及固定專人及專門用于pgd的設施，單細胞pcr也可收到良好的效果。

2.污染：這是影響基因病診斷，產生誤診及診斷失敗的另一個重要因素。污染物主要來源于透明帶內殘余的及母體的卵泡細胞。前者可用單胞漿注射的方法避免，后者可用多重pcr同時檢測胎兒及其父母的dna指紋加以鑒別。前次診斷殘留的擴增產物，是污染物的另一來源，除了按pcr常規嚴格操作之外，用巢式pcr或熒光pcr對減少此類污染很有幫助。

3．fish的有關問題：首先是用fish診斷與年齡有關的非整倍體是否應作為常規尚有爭論。這方面需要進一步的研究。fish的錯誤率約為15%。體外受精期的嵌合體發生率較高、fish信號尚缺乏統一的標準等問題都是影響fish診斷率的因素，這些問題的解決有賴于多中心大規模的合作研究，以確定合理的分析標準及標準化的操作程序。

4.多基因異常的診斷問題： 涉及多個突變位點的單基因病診斷、多基因病診斷、染色體組分析如cgh，都要求獲得足夠的dna。目前，相關的研究集中在用dop-pcr或pep方法擴增單細胞dna方面。dop-pcr的擴增效率在80%左右，選擇合適的引物有望進一步提高擴增效率。

5.診斷取材：現行植入前遺傳病診斷，主要利用卵裂球的dna進行分子診斷或用間期fish診斷染色體數目異常。與之相比，用囊胚期細胞進行診斷，可以分析多個細胞，提高診斷率。利用聯合培養或順序培養（sequential culture）能夠提高囊胚期細胞培養的成功率。

三、展望

在過去的10年里，pgd取得了顯著的成績，展望未來，pgd技術可望在下述方面進一步發展。

1．多重突變分析：利用多重pcr、cgh、wga，以及間期核轉換技術，人們已經能夠診斷涉及不同位點的突變以及全染色體核型分析。但是，這方面的診斷仍受到一定限制。目前，國外一些研究中心正在探索dna芯片技術在pgd領域的應用前景。利用這種技術，可以同時分析單一細胞內上千種基因突變，能夠極大地提高診斷效率。此外，變性梯度凝膠電泳及單鏈多態分析技術也正受到廣泛關注。在不遠的將來，單細胞將可能有效地用于診斷多個突變或染色體組核型分析。

2．診斷標準化：目前，在世界范圍內要求pgd的人越來越多，已有的研究中心無法滿足需要，客觀上要求將pgd的診斷程序標準化。在我國，pgd的相關研究尚處在初始階段，鑒于我國經濟基礎比較薄弱，遺傳病散在發生的特點，很有必要集中人力、物力，建立各大區的植入前診斷中心，這對于規范診斷標準，加強管理，提高診斷水平有重要意義。

3.倫理學研究： pgd中不可避免地涉及有關倫理學問題，例如植入前診斷中的性別選擇，腫瘤易感性分析都會激起廣泛的興趣。

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1散發性CSVD與VaD相關的遺傳學研究

流行病學研究證實，高血壓、糖尿病、高脂血癥、同型半胱氨酸血癥、C反應蛋白增加、纖維蛋白原升高、吸煙、肥胖、呼吸睡眠暫停、長期慢性感染、卒中、反復發作的短暫性腦缺血發作和缺血性心臟病等是血管病變的危險因素，也是CSVD與VaD共同的危險因素?。對CSVD和VaD的危險因素進行遺傳學研究，進而對其進行有效干預和一級預防對避免卒中和VaD具有重要意義。

基金項目：國家自然科學基金（1160472)；廣西科學研究與技術開發計劃項目：（桂科攻1550054-5)；柳州市科學研究與技術開發計劃：（201F010401)11脂質代謝異常脂質代謝異常是CSVD和VaD的共同危險因素。分子遺傳學研究發現，膽固醇從頭合成的調節劑--固醇轉錄因子調節元件結合蛋白1等位基因攜帶者患癡呆的風險更高；在癡呆患者中，膽固醇"24S-羥化酶的水平有顯著改變M。而在CSVD中，高膽固醇水平對于腦小血管的影響顯而易見，其直接促成腦血管的脂質透明變性,進而引起腦的小血管病變M。

另外一個與癡呆相關的基因是載脂蛋白E4(apolipopro-teinE4,apoE4)的等位基因，它與其他風險因素協同作用直接影響CSVD。上海的一項調查研究證實，VaD患者apoE4出現的頻率顯著高于正常對照組6。另一項研究表明，apoE4的基因多態性與20%的VaD有關。一項關于中國人VaD與apoE4關聯性的薈萃分析表明，apoE4基因多態性與中國VaD患者的發病相關,研究還指出apoE4的等位基因增加患VaD的風險，而apoE的等位基因有防止VaD的作用。

基質金屬蛋白酶（matrixmetalloproteinase,MMPs)的功能是重構組織損傷和修復過程中的細胞外基質。目前為止，此家族有名成員與VaD相關。與VaD相關的MMP4基因啟動子位于（1G/2G,-1607bp),由于鳥嘌呤的插入或缺失，致使2G等位基因和基因型的存在（2G2G和1G2G),進而增強轉錄相關基因的活性[1647]。研究表明，與AD患者及正常對照組相比,VaD患者腦脊液中MMP~9的水平明顯升高,進一步分析發現，MMPs的三種啟動子位點合并基因型能增強VaD的易患性。

12血管血壓因素腦血管出血或梗死與患者的凝血功能息息相關，纖維蛋白原和凝血因子在其中扮演著重要角色。纖維蛋白原基因多態性基因型A與梗死風險相關，隨著纖維蛋白原水平的升高，VaD的風險明顯升高。研究表明，纖維蛋白原基因啟動子A等位基因將增加腔隙性腦梗死的風險。在凝血因子MVal4Leu的多態性研究中，M的纈氨酸等位基因通過增加纖維蛋白的溶解阻力，增加血栓形成風險。凝血因子V、凝血酶原、纖維蛋白原、纖溶酶激活物 以及其他蛋白抑制劑與非遺傳性小血管梗死和VaD的風險相關62。白細胞介素6和細胞間黏附分子1基因的多態性與缺血性腦梗死顯著相關，其組合更增加了缺血性腦梗死的發生風險2。血管內皮型一氣化氮合酶有增加不完全皮質下梗死和VaD的風險。關于血管內皮型一氣化氮合酶基因型G94T和94TT的多態性研究表明，兩者與亞甲基四氫葉酸還原酶（methylenetetrahydrofolatereductase,MTHFR)的C677TT多態性及血管緊張素轉換酶的D/D基因型協同關聯,增加缺血性腦梗死的風險，可與高血壓、糖尿病、吸煙、酗酒等進一步產生協同效應。

血管緊張素轉換酶的D/D基因型和MTHFR的C677TT基因型與不完全皮質下梗死及VaD的發病相關,認為其是腦白質病變的獨立危險因素，與腦白質的改變以及認知功能衰退密切相關M。此外,MTHFR的C677TT基因型與血管緊張素轉換酶的D/D基因型表現出協同效應。但目前關于血管緊張素轉換酶D/D基因型與腦卒中及VaD的研究尚存在爭議,這可能是由種族差異或其他協同因素造成的,也可能是樣本量的問題。

1炎癥與氣化應激因素同型半胱氨酸水平的升高可產生過多的活性氣并抑制一氣化氮合酶，進而造成血管功能障礙；同時同型半胱氨酸又促進脂蛋白a與纖維蛋白結合，產生自由基,促進低密度脂蛋白氣化，進一步導致卒中發作和VaD發生。

MTHFR是同型半胱氨酸代謝的主要酶類之一。MTHFRC677T的多態性與年輕患者的腦缺血相關,其TT型基因與無癥狀腦梗死及腦白質病變相關2。

血小板內皮細胞黏附分子1是白細胞跨內皮遷移的關鍵介質,其基因的多態性是冠狀動脈疾病與血清血小板內皮細胞黏附分子1水平的共同風險因素，其水平的升高增加了腦梗死的風險,可能與VaD發病及再次加重相關。

谷胱甘肽-轉移酶1具有抗氣化應激作用，其外顯子4(Ala140Asp和Glu155Glu)是基因的兩個錯義突變。研究表明，谷胱甘肽-S-轉移酶1Ala140Asp多態性降低了酶的活性，降低了抗氣化應激的作用，增加了腦梗死和VaD的易患風險。

14其他研究證實,新發現的17q25基因位點與缺血性卒中的白質高信號相關,特別是與rs994的多態性有關。同時此研究進一步說明，17q25單核苷酸的多態性與腔隙性腦梗死并無關聯。雖然17q25基因位點與白質高信號有關，但并不是通過責任血管和小血管促進梗死發生，具體原因還未見相關報道。

最近的一項全基因組關聯研究也未發現VaD與散發性CSVD間存在確定的遺傳關聯。研究表明，腫瘤壞死因子基因的啟動子（C-770T的T序列和TTGAT)表達的降低可增加女性患VaD的易患性。非受體酪氨酸激酶SYK基因的內含子的rs290227多態性增加患VaD風險。對血小板白細胞C激酶底物同源性結構域B家族2成員的相關性研究也傾向于其對VaD有遺傳易患性。

2單基因遺傳性CSVD與VaD的遺傳學研究

單基因遺傳性CSVD主要有家族性淀粉樣腦血管病(familialcerebralamyloidangiopathy,FCAA)、伴有皮質下梗死

和白質腦病的常染色體顯性遺傳性腦動脈病（cerebralautosomaldominantarteriopathywithsubcorticalinfarctsandleukoen-cephalopathy,CADASIL)、伴有皮質下梗死和白質腦病的常染色體隱性遺傳性腦動脈病（cerebralautosomalrecessivearteri-opathywithsubcorticalinfarctsandleukoencephalopathy,CARA-

SIL)、伴視網膜病的遺傳性小血管病、彌漫性軀體性血管角化瘤病等。

FCAA是一種因淀粉樣蛋白積聚在血管壁導致的卒中和VaD,其至少包括以下幾種類型：荷蘭型，是由第21號染色體APP695基因的61位密碼子發生了G-C的單一位點突變；冰島型，位于20p112的CC基因外顯子CTG突變為CAG,并存在限制性內切酶識別位點的缺失；此外還有Flemish突變、北極型突變、愛何華型突變等。散發性FCAA主要與載脂蛋白E基因、早老素基因、a抗糜蛋白酶基因、腦啡肽酶基因、Ap降解酶以及轉錄生長因子h等的基因突變有關。

CADASIL的致病基因是Notch基因，現已發現190多種Notch基因多態性與CADASIL有關。Notch基因位于表皮生長因子受體的串聯重復區，其基因突變導致半胱氨酸殘基的增益和損失,影響血管平滑肌功能和血管內環境的穩定，導致這些血管平滑肌細胞凋亡缺陷，影響微血管功能，繼發神經元損傷。

CARASIL的主要癥狀與CADASIL相似,半數患者有卒中發作,而無卒中癥狀的患者主要表現為進行性腦功能損害，也可出現精神癥狀。研究表明，HTRA1基因突變與CARASIL

有關。

伴視網膜病的遺傳性小血管疾病主要有種類型，其中遺傳性視網膜病未見有癡呆病例報道；伴視網膜■腎病^卒中的遺傳性內皮細胞病雖有卒中癥狀,但也未見癡呆病例報道；大腦視網膜血管病有卒中和癡呆癥狀。三者的致病基因均定位于p211~p21,屬常染色體顯性遺傳。目前研究認為，伴視網膜病的遺傳性小血管疾病致病基因位于p211~p21的DS157~DS564區域，具點尚未見報道。

彌漫性軀體性血管角化瘤病的臨床癥狀幾乎遍布全身各個臟器,在中樞神經系統表現為卒中、感覺性神經性耳聾以及VaD,其是一種性連鎖遺傳性疾病，是位于Xq22位點的a^半乳糖苷酶A基因突變,導致溶酶體X^半乳糖苷酶A功能缺陷，鞘磷脂GB在全身各個系統的血管異常表達。彌漫性軀體性血管角化瘤病的基因突變主要是a^半乳糖苷酶A的單錯義突變、插入、重復和復合重整。

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關鍵詞：醫學院校；傳統體育養生；價值

中圖分類號：G420文獻標識碼：A文章編號：1671—1580（2013）02—0096—02

中國有著歷史悠久的傳統養生學文化，在西漢時期就出現了如五禽戲、導引等養生功法。養生學是現代體育與傳統醫學之間的一門交叉學科，是我國傳統體育的內容之一，同時又是傳統醫學的重要組成部分。傳統體育養生從字面意思理解， 就是用傳統養生方法進行保健的體育運動。自古以來， 人們對養生保健的研究就十分重視， 并在實踐中積累了極為豐富的經驗， 創建了系統的理論及風格獨特的傳統體育養生方法。這些養生方法內容豐富， 在增進人類健康，養生保健、延年益壽方面做出了寶貴的貢獻， 是中國文化寶庫中的一朵奇葩。

一、研究方法與對象

本文采用文獻資料法、邏輯與分析法等研究方法，以醫學院校開設傳統體育養生課的學生作為本次研究的主要對象。

二、傳統體育養生文化在普通醫學院校開展的現狀

1.傳統體育課的開展情況

目前傳統體育養生課程在醫學院校開設的課程較少，主要以開設太極拳為主，不能全面體現民族傳統體育養生的內涵。此外，在民族傳統體育養生課程教育中，課程教學過于簡單、基礎教育缺乏、民族文化意識淡薄，對構建民族傳統體育養生課程體系的重要性認識不足。研究方法簡單，缺乏完整的研究體系，很多人忽視了傳統體育養生所特有的預防保健作用——“動靜相兼”，相當一部分人對養生體育功能缺乏全面認識。

2.大學生身體素質調查

目前，我國在校大學生身體素質，從學生體質健康標準測試中可以得到結論，學生身體素質在逐年下滑，具體表現在學生心理、生理等方面存在障礙，運動能力不斷下降，既有家庭的過度溺愛，也有來自社會激烈的競爭壓力造成的，同時還與學校的教學管理的模式以及大學生的心理承受能力有關，所以要求家庭、學校、社會通力合作，采取切實有效的措施提高現代大學生的身體素質和心理素質。

三、研究結果與分析

1.醫學院校開設傳統體育養生課的價值

民族傳統體育養生是在中華民族傳統歷史文化中形成的具有民族特色的傳統體育項目，是古代中醫理論與傳統文化在一定的社會歷史條件下形成的產物，是中華民族傳統體育文化的瑰寶。

（1）民族傳統體育養生的康復醫學價值。在紀樹榮《康復醫學》一書中，對康復醫學的定義主要以消除和減輕人的功能障礙，彌補和重建人的功能缺失，設法改善和提高人的各方面功能的醫學學科，也就是功能障礙的治療、訓練和處理的醫學學科。體育療法是現代康復醫學的重要內容和手段。其中民族傳統體育養生項目可以作為康復體育療法很好的內容之一，如健身氣功五禽戲、八段錦等。因為，這兩種傳統健身體育養生功法以活動筋骨、疏通氣血、防病治病、健身延年為目的，以內氣運行為主，重視意念的鍛煉，體現了形、意、氣的合一，符合中老年人的運動規律。所以，醫學院校康復專業的學生不僅要學好康復醫學專業課程，還可以把傳統體育養生課程作為第二專業課程來學習，這樣不僅可以用專業知識去治療一些病人，還可用所學到的體育康復知識去給病人做康復治療。

（2）民族傳統體育的現代養生價值。對于我們每一個人來說，健康才是最寶貴的財富，而中華傳統體育養生從古至今都在不斷探索著強身健體之道。以“生為第一”、“延年益壽”為目的，是人們不斷追求之事。從中華傳統體育養生發展史來看，歷代享有盛譽的中華傳統體育養生名士層出不窮，其中華陀、陶弘景等人是其中杰出的代表。兩千多年來，養生家在人體科學、醫學、保健學等領域中積累了豐富的體育養生思想。當然，限于當時歷史條件，中華傳統體育養生作為中華民族傳統養生文化的一部分，今天我們研究傳統體育養生，主要是研究他的體育養生思想及其現代養生價值，古為今用，特別是醫學院校的大學生更應該認真學習傳統養生理論，為人類的醫學保健事業的發展做出積極貢獻。

（3）民族傳統體育養生的中醫養生價值。中國的醫學吸收了當時已廣泛流行的陰陽、五行等觀念，并結合當時行醫治病的實踐，探討了人體結構和機能，在此基礎上確立了以醫養生、養生為醫的觀點。醫學院校學生學習古代養生理論，主要的是能讓學生了解養生文化、養生方法和養生思想及其與中醫養生的關系，不斷探索新的養生運動理論，為廣泛開展養生運動提供科學的借鑒和依據，使傳統體育文化不斷地走向世界，服務于人類。

（4）民族傳統體育的教育學價值。 醫學院校開設的傳統體育課是在吸收了古代哲學與古代醫學理論精華而形成的一種課程體系。古代醫學理論中的“天地一體”、“五臟一體”、“天人相應”的整體觀念同樣適用于傳統的保健體育。而中醫理論認為，人的五臟六腑是一個整體。傳統的健身思想也認為體育的作用不僅在于發展身體的機能，或是治療身體的某種疾病，而是通過調整人的身體心理，使人的中樞神經系統得到調理，不斷增強人的適應能力，以增強體質。作為醫學院校學生在學習醫學時，也應該接受傳統健身文化的熏陶，從而為傳統體育課程在大學的開設奠定良好的理論基礎。

四、開設傳統體育養生的意義

現代人比以往任何時候都更加關注自己的健康狀況和生活質量。由于國民的健康對國家的發展、社會的進步和個人的幸福都至關重要，所以，人們在不斷提高生活質量的同時，“ 養生”越來越受到現代人的重視。中國傳統體育養生思想是體育養生家在從事與養生有關的體育活動中萌發、沉淀下來的傳統養生思想，是養生人士從事體育養生活動的思想依據和思想方法，也包括養生人士已取得的養生成就中蘊蓄的思想精華。傳統體育養生主要是通過有氧運動等健身途徑促進人體健康，增強人的社會適應能力，要繼承和發揚傳統養生理論與方法，就得使人們對這些傳統的理論與方法有深刻確切的認識，要使人們從不同側面了解養生的原理、功法。高校在體育課教學中應加大傳統體育養生課的教學，不斷地推廣，將有力促進中華養生理論的發展，對繼承、發揚中華傳統體育養生文化精華，大力宏揚民族文化、民族精神，不斷提高居民素質都具有十分重要的作用。

五、結論與建議

1.醫學院校學生通過體育課開設民族傳統體育養生課程，使學生認識到體育養生課意義及價值所在，通過不斷的學習，最終運用到所學專業上去，特別是康復醫療專業的學生，最終對個人和社會都會產生有益作用。

2.學生通過學習民族傳統體育養生課程不僅可以學到養生保健知識，還可以宏揚民族文化、民族精神，使我國悠久的養生文化得到很好的傳播。

3.高校體育教學可以把民族傳統體育養生課程作為教學改革試點內容，加大推廣力度。

4.從本次調研醫學院校開設傳統體育養生課的情況來看，開展并不盡如人意，開設有關民族傳統體育養生的課程較少，不能全面體現民族傳統體育養生的內涵。

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