分子生物論文范文

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篇1

1.1采集地點的選擇伊寧縣位于東經80°13′～82°42′，北緯43°35′～44°29′之間，東鄰尼勒克縣，西與伊寧市和霍城縣接壤，南鄰伊犁河，與察布查爾、鞏留兩縣隔河相望。同時，位于伊犁河谷中部，水草豐富，境內的伊寧口岸是伊犁地區重要的貿易口岸。

1.2實驗材料

1.2.1蜱的來源2013年4－5月，從伊寧縣的2個采集點、2個綿羊群，每群＞30只，均未藥浴，采集其體表寄生蜱，共獲得硬蜱324只，放置于潮濕陰暗處，以保持其存活。

1.2.2主要試劑PCR所用試劑均購自上海生工生物工程技術服務有限公司；DNA提取試劑盒（DNeasyBloodTissueKit）購自德國Qiagen公司；其他試劑均為分析純。

1.3實驗方法

1.3.1蜱種鑒定參照《中國經濟昆蟲志》［9］，用普通解剖顯微鏡將324只蜱進行形態學鑒定，初步分類后，從中選取50只用配備數碼照相功能的解剖顯微鏡（LEICAM165C）拍攝圖片，對蜱的盾板、假頭、假頭基、肛側板、氣門板、第一緣垛、孔區（雌蜱）等形態進行對比觀察并測量［11］。1.3.2蜱的處理和DNA提取將蜱標本分別依次用濃度為70%、50%、30%、10%的乙醇溶液于37℃搖床中振蕩沖洗1h，再用超純水反復沖洗，干燥。最后置于消毒滅菌的1.5mlEP管中。按照DNA提取試劑盒使用說明書提取蟲體基因組DNA，置-20℃保存備用。

1.3.3基因擴增用上游引物5′-CTGCTCAATGATTTTTTAAATTGCTGTGG-3′，下游引物5′-CCGGTCTGAACTCAGATCAAGT-3′擴增線粒體16SrRNA序列［12］；上游引物5′-CAAAAWCCTGGTAAAATTAAA-3′和下游引物5′-GCACTATCAAGCAACACGACT-3′擴增COⅠ序列［10］。25μlPCR反應體系：模板1.5μl（約50ng），上游和下游引物各0.75μl（75pmol），50mmol/LKCl，10mmol/LTris⁃HCl（pH8.3），1.5mmol/LMgCl2，1單位TaqDNA聚合酶。PCR反應循環參數為：①16SrRNA為94℃預變性5min，92℃變性30s，54℃退火30s，72℃延伸30s，共38個循環，72℃終延伸8min。②COⅠ為94℃預變性5min，92℃變性30s，50℃退火30s，72℃延伸60s，共38個循環，72℃終延伸8min。擴增片段后送上海生工生物工程技術服務有限公司測序。1.3.4序列分析及系統進化樹構建結合GenBank登錄的圖蘭扇頭蜱的16SrRNA和COⅠ參考序列，將本實驗PCR擴增的6條16SrRNA及6條COⅠ序列測序結果與參考序列比對，運用Mega5.0軟件的ClustalX程序分析，計算遺傳距離并構建遺傳進化樹。

2結果

2.1蜱種鑒定所鑒定蜱共324只（168、156），蟲體體型較小，雌蟲體長3.2～5.5mm，雄蟲體長2.9～3.6mm，呈褐色，背腹扁平似卵圓形，芝麻至米粒大，雌蜱飽血后可膨脹達蓖麻籽大。體分為假頭和軀體兩個主要部分（圖1A）。假頭基呈六角形，側角明顯，后緣微凹（圖1B）。雄蜱盾板覆蓋整個背部，雌蜱盾板覆蓋背前部，前部較窄，后部圓鈍，盾板遍布刻點，以細刻點居多，粗刻點少而零散（圖1C）。眼卵圓，靠近盾板前部邊緣。須肢粗短，中部最寬，前端稍窄。雄蜱氣門板長卵形（圖1D）。體端有緣垛，中垛大于邊垛，常有尾突（圖1E）。有肛溝，雄性肛側板后緣內斜明顯，內緣具角突，長約為寬的2.5～3.0倍，內緣中部稍凹，后緣向內顯著傾斜，其后方凸角明顯（圖1F）。結合有關文獻［9，13］認為伊寧縣的蜱具有硬蜱科扇頭蜱屬圖蘭扇頭蜱的特征。但由于吸血、飽血雌蜱及部分未成熟或形態變異的雄蜱，僅用傳統形態學分類方法不能準確區分。因此，從324只中選出6只雌雄分別具有形態差異的蜱（4、2），根據采集地點分別將其命名為YN-1、YN-2、YN-3、YN-4、YN-5和YN-6。YN-1為當地典型雄性圖蘭扇頭蜱；YN-2和YN-3為半飽血雌蜱，因其腹部吸血膨脹已無法觀察緣垛，肛側板和副肛側板難以區分形態且邊界不清；YN-4、YN-5和YN-6為部分形態特征改變雄蜱，YN4和YN5體端較寬似倒置三角形與典型的圖蘭扇頭蜱卵圓形體端不同，且YN5氣門板呈長逗點形與血紅扇頭蜱氣門板相似；YN6肛側板后緣圓鈍，凸角不明顯。因此對這6只蜱采用分子生物學方法進一步分析，對上述形態學鑒定結果進一步驗證。

2.2分子生物學鑒定

2.2.1PCR擴增通過PCR擴增上述形態學差異較大的6只圖蘭扇頭蜱線粒體DNA，產物經1%瓊脂糖凝膠電泳分析，均獲得特異性很好的PCR產物，與預期目的片段一致（16SrRNA約為460bp，COⅠ約為760bp）。

2.2.2圖蘭扇頭蜱16SrRNA和COⅠ基因片段組成利用Mega5.0軟件計算6只圖蘭扇頭蜱的16SrRNA和COⅠ基因片段堿基組成。16SrRNA基因片段A、T、C、G的平均堿基含量分別為36.68%、37.12%、10.7%和15.5%，堿基A＋T平均含量是73.78%。COⅠ基因片段A、T、C、G的平均堿基含量分別為38.56%、31.78%、14.12%和15.54%，堿基A＋T平均含量是70.34%。

2.2.3圖蘭扇頭蜱基因序列比對及系統進化樹運用Mega5.0軟件的ClustalX程序進行多重序列比對后，16SrRNA獲得2種不同序列，并登錄GenBank，登錄號分別為KF547987和KF547989；COⅠ獲得3種不同序列，登錄號分別為KF688136、KF688137和KF688138。各結合GenBank登錄的3種扇頭蜱的參考序列構建系統進化樹。6只圖蘭扇頭蜱16SrRNA基因片段的遺傳變異很小，共檢測出2個單倍型，1個變異位點。其中YN-2、YN-3、YN-4和YN-5序列相同，為一種單倍型；YN-1、YN-6在216位點處為轉換位點（T-C），為一種單倍型。基因序列比較結果顯示同源性均在99.5%以上，遺傳距離為0.3%～0.5%。而上述6只圖蘭扇頭蜱的COⅠ基因片段序列變異較大，共檢測出3個單倍型，4個變異位點。YN-1、YN-2和YN-6序列相同，為一種單倍型；YN-3和YN-5檢測到3個變異位點，均為轉換位點（A-G），無插入/缺失和顛換現象；YN-4在上述變異基礎上，于574位點處發生轉換（A-G）。基因序列比較結果顯示同源性均在98.6%以上，遺傳距離為0.3%～1.9%。

3討論

篇2

[摘要] 生物化學與分子生物學研究生的培養，在該學科研究生碩士點的建設中占重要地位，本文對醫學院校生物化學與分子生物學研究生的培養實踐進行反思，旨在提高研究生論文質量。

[關鍵詞] 生物化學；論文質量；醫學院校研究生

[中圖分類號] G642[文獻標識碼] C [文章編號]1673-7210（2011）08（a）-119-02

Study on the degree thesis quality of biochemistry and molecular biology students in medical couege

FU Xinhua, YANG Xiaoyun, WANG Shouxun*

Department of Biochemistry and Molecular Biology, Weifang Medical College, Shandong Province, Weifang 261053, China

[Abstract] Training graduate students of biochemistry and molecular biology have an important station in biochemistry development. We reflected the practice of biochemistry and molecular biology training in medical graduate students to improve the quality of thesis.

[Key words] Biochemistry; Thesis quality; Medical graduate student

當前我國社會競爭日趨激烈，從而加大了對高學歷、高素質人才的需求，高校招生規模的年平均增長率是26.9%。在此形勢下，如何調整研究生的培養目標和教育模式，已成為各大高校研究生教育需要解決的當務之急，因此探討研究生培養目標和教育模式具有重要意義。

醫學生物化學與分子生物學研究生的培養和教育是造就高層次人才的渠道之一，如何加強對醫學研究生培養全過程的質量監控，保證培養質量，是目前高校值得研究的重要課題。其中，建立醫學院校生物化學與分子生物學研究生教學督導制度及對研究生學位論文進行質量監控，是保障培養質量的有效途徑[1-2]。

1 我校生物化學與分子生物學研究生培養存在的問題

當前我校生物化學與分子生物學專業研究生實際培養工作中，存在一些問題，主要表現在：

1.1 對研究生培養環節的監控不到位

長期以來，研究生培養多注重對結果的評價，以研究成果、畢業論文和就業狀況等來衡量研究生培養的優劣，而對研究生培養過程的監管不足。

1.2 導師對研究生培養過程的指導投入不足

隨著研究生招生規模的擴大，每位導師指導的學生數量增多，導師整體負荷增大，師生間的直接互動減少，加之導師工作忙，事務多，時間和精力投入都難以到位，以致出現一些研究生培養“放羊”現象，如課題未經論證、開題報告時間滯后、畢業論文答辯匆忙等，從而制約了研究生的培養質量。

1.3 研究生學位論文質量有下滑趨勢

招生規模擴大以后，導師壓力增大，難以保證每個學生高質量的完成學位論文，造成同年畢業的研究生論文質量良莠不齊。

2 提高醫學院校生物化學與分子生物學研究生學位論文質量的幾點思考

研究生階段的教育重在培養學生的科研能力，而學位論文能全面衡量研究生的綜合水平。其中，論文選題和開題的嚴格把關是學位論文質量管理的一個重要方面，對保證和提高學位論文質量至關重要[3-4]。本文分析了醫學院校生物化學與分子生物學碩士學位論文各環節存在的問題，提出了加強其質量監控的具體措施。

2.1 美國研究生教育模式

美國研究生教育在世界研究生教育中占重要地位，19世紀以來，美國以培養大學教師和高水平研究人才為研究生教育目標。研究生教育便擔負起培養各學科高級研究人才的任務。從20世紀70年代至今，美國研究生的教育質量不斷提高，美國研究生教育始終保持較高的整體質量、宏觀質量和體系質量[3]。

目前美國研究生教育的評估力量主要來源于社會和高校自身，且以社會評估為主。內部評估遵循“寬進嚴出”的原則，從招生、課程學習、科學研究、中期考核、考試、論文寫作、答辯等方面進行質量控制[4]。美國通常采用高校（系、科）評分的方法評價高校質量，通過評價高等院校的實際辦學水平及在大學群與社會中的相對地位來促進其質量提升。培養過程有規范性要求，并嚴格按計劃和程序實行淘汰[5]。

2.2 提高我國醫學院校生物化學與分子生物學研究生論文質量的建議

根據我國的研究生培養目標，研究生應當具備從事科學研究和獨立承擔專門技術工作的能力。研究生教育規模迅速擴大，質量問題日益凸顯，引起教育界及社會各界的關注[6]。質量管理系統的功能是對高校研究生培養質量保障系統的具體組織與執行，它直接決定了研究生培養質量保障系統功能的發揮。

2.2.1 研究生培養中期考核培養過程的督導包括導師遴選、培養條件、培養方案、課程設置等的監督、檢查，重點是中期考核。實施中期考核是研究生培養過程的重要環節，中期考核未達標者，可給予一定形式的警示，令其限期達標。

2.2.2 對生物化學與分子生物學培養方案與研究生培養計劃的審查與督導審查與督查是督導工作的重點。一方面對其培養方案進行審查，另一方面查閱所選學位點的研究生培養計劃，重點審查其培養目標是否合適，課程設置與安排是否合理等。

2.2.3 加強教學與管理研究生部加強學籍管理、宏觀管理、質量檢查與評估等工作，全面監督課程設置、教學實施、成績考核、論文評審、學位答辯等工作。

2.2.4 學位論文質量監控是重中之重學位論文監控包括開題報告、論文把關、質量評定、論文質量等級及學位授予。督導的重點是檢查畢業論文質量，進一步完善論文“盲審”制度能更好地確保畢業論文質量。①開題報告質量監控：開題報告是提高論文質量的重要環節。開題報告重點檢查文獻是否滿足論文課題的要求、有無書面報告書等。中期的學術報告或階段總結重點檢查論文進展情況、后期計劃、存在問題及指導小組人員的評議意見，以促進論文質量的提高。②學位論文質量監控：研究生學位論文水平是評估研究生質量的重要指標之一，必須加強對研究生學位論文的質量監控與督導。學位論文的質量監控重點是檢查論文質量，協助研究生部對論文進行質量抽查，將該部分論文送予外校專家進行雙盲審查，查閱專家評審意見，并參加論文答辯會，提出意見，供導師、管理部門參考和質量抽查，從而保證論文質量。

2.2.5 開展對生物化學與分子生物學導師的督導工作著重從研究生的課堂、教學、文獻綜述、開題報告、論文中期檢查、學術活動、學術交流、學位論文質量與論文答辯等方面對導師工作進行督導檢查。

本文通過對生物化學與分子生物學專業研究生培養過程存在問題的分析，圍繞加強研究生培養過程管理、全面提高研究生培養質量，從控制的重點、手段和主體等方面提出了進一步實施研究生培養質量監督控制的相關措施，以期對研究生培養工作有所裨益。

[參考文獻]

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[3]郭巖,劉愛華.優化研究生課程評價,保障培養質量[J].高教研究,2005, 29:48-49．

[4]王則溫,章麗萍,張君.提高博士生培養質量的關鍵是建設高水平學科[J].學位與研究生教育,2002,(11):29-31．

[5]湯磊.醫學碩士生課程教學質量評價模型實證研究[J].醫學教育探索,2004,3(1):47.

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